高速微量離心機(jī)與超速離心機(jī)的離心方法 什么是高速微量離心機(jī)? 高速微量離心機(jī)特別適用于高速微濾。一般轉(zhuǎn)速為16000r/min,容量較小。采用微型無(wú)刷直流電機(jī),升降速度快,無(wú)灰塵,無(wú)灰塵。維持。電子門(mén)鎖安全可靠。微電腦控制,外形采用*化鋼結(jié)構(gòu),精致美觀,數(shù)字顯示,RCF離心力開(kāi)關(guān)顯示,編程操作,使用方便。 超速離心機(jī)的離心方法 離心分離生物大分子和亞細(xì)胞物質(zhì)的基本原理是它們?cè)谝后w介質(zhì)中根據(jù)不同的沉降速度,或不同的密度形成不同的區(qū)域,并在液體介質(zhì)中的不同位置將它們一一分離。前者是沉降速度法。使用這種方法時(shí),液體介質(zhì)的最大密度小于樣品中最小顆粒的密度。離心速度快,時(shí)間短;后者是沉降平衡法,液體介質(zhì)的最大密度為 大密度大于樣品中最小顆粒的密度,離心應(yīng)采用較低的速度和較長(zhǎng)的時(shí)間。實(shí)際操作有幾種形式: 差速離心 這種方法是選擇不同速度的離心來(lái)分離不同的成分。例如,大顆粒和上清液先低速沉降,中顆粒在高速離心后沉降在上清液中,小顆粒在超速離心后沉降在上清液中。通過(guò)逐步增加離心力來(lái)分離上層流體,從而分離出不同大小的顆粒。這種方法比較簡(jiǎn)單方便。分離的組分沉入管底,因此您可以快速濃縮所需組分并減少體積。但是,回收率和純度之間存在矛盾。為了提高回收率,需要提高離心速度或延長(zhǎng)離心時(shí)間,使大小相近的顆粒也沉到管底。因此,該方法多用于樣品的粗提純或初步濃縮。 速度區(qū)(或速度梯度)離心 在該方法中,樣品被放置在連續(xù)密度梯度液體上。通過(guò)離心,大顆??焖俪两?,小顆粒緩慢沉降。一段時(shí)間后,相同的粒子在相同的深度形成一條帶,從而將各種成分分開(kāi)。適用于分離密度相同但尺寸不同的物質(zhì)。例如,不同的蛋白質(zhì)成分具有相似的密度但具有不同的分子量。這種方法很容易將它們分開(kāi)。但是,要分離密度不同、大小相近的物質(zhì)并不容易。蔗糖梯度是一種常用的培養(yǎng)基。使用不同濃度的蔗糖溶液(5%-60%)形成梯度進(jìn)行梯度分離心。然后分別收集不同區(qū)域的組件。 沉降平衡離心 這是一個(gè)靜態(tài)方法。在離心管中形成液體梯度。在離心過(guò)程中,每個(gè)組分以不同的速度下沉,但最終保持與自身相同的密度,形成一個(gè)狹窄的平衡區(qū)并保持相對(duì)穩(wěn)定。為了使樣品的所有成分達(dá)到其平衡位置,需要長(zhǎng)時(shí)間離心。該方法適用于分離大小相近但密度不同的物質(zhì),如核酸的分離。氯化銫梯度是平衡離心中常用的介質(zhì)。它具有高分辨率,可以區(qū)分密度差為0.05的成分。但是離心時(shí)間要十幾到幾十個(gè)小時(shí),而且價(jià)格很貴。已經(jīng)有一種名為“Percoll"的 Ficoll 溶液可以替代氯化銫梯度。介質(zhì)可快速形成梯度,使離心時(shí)間大大縮短至1-2h,同時(shí)仍具有良好的分離效果。并且有匹配的標(biāo)記珠(Densitymarkerbeads)來(lái)確定樣品的密度。 |